用阳离子交换树脂分离下列氨基酸对,用pH7.0的缓冲液洗脱时那种氨基酸先被洗脱下来?(l)Asp和Lys(2)Arg和Met(3)Glu和Va1(4)Gly和Leu(5)Ser和A1a
由于是交换树脂层析,氨基酸的与树脂的亲和力主要取决于他们之间的亲和力,其次是氨基酸与树脂之间的疏水相互作用。疏水作用要弱者,与树脂吸引力不够强,最先被洗下来。根据氨基酸可电离基团的pKa值,我们可以确定题中每组氨基酸的结构以及在pH7时它们的平均净电荷。如果平均净电荷相同,则取决于它们侧链基团的疏水性。 (1) 天冬氨酸净电荷为-l,赖氨酸净电荷为+1;赖氨酸与树脂磺酸基相反离子吸附力大。因此,天冬氨酸先被洗脱下来。 (2) 精氨酸净电荷为+1,甲硫氨酸净电荷接近零。因此,甲硫氨酸先被洗脱下来。 (3) 谷氨酸净电荷为–1,缬氨酸净电荷接近零,谷氨酸的负电荷与树脂荷负电的磺酸基之间相互排斥,减小了谷氨酸与树脂的附着力,故先被洗脱下来。 (4) 甘氨酸和亮氨酸的净电荷都接近零,但亮氨酸庞大的非极性侧链与树脂骨架之间的非极性相互作用力大。故甘氨酸先被洗脱下来。 (5) 丝氨酸和丙氨酸的净电荷都接近零,但丝氨酸的侧链非极性小,故先被洗脱下来。
举一反三
- 用阳离子交换树脂分离下列氨基酸对,用pH7.0的缓冲液洗脱时那种氨基酸先被洗脱下...(4)Gly和Leu(5)Ser和A1a
- 如用阳离子交换树脂分离Asp、Lys和Met三种氨基酸,用pH 7.0的缓冲液洗脱时,先下来的氨基酸为Asp
- Lys、Arg、Asp、Glu、Tyr和A1a的混合液在高pH时,加到阴离子交换树脂上,用连续递减的pH溶液洗脱时,预测这些氨基酸的洗脱顺序。
- 用强酸性阳离子交换树脂分离下列每对氨基酸,当用PH7.0的缓冲液洗脱时,下述每对中先从柱上洗脱下来的是那种氨基酸?(1)天冬氨酸和赖氨酸,(2)精氨酸和甲硫氨酸,(3)谷氨酸和缬氨酸,(4)甘氨酸和亮氨酸,(5)丝氨酸和丙氨酸
- 欲在pH6.0的缓冲液中,利用离子交换层析分离氨基酸,请判断下列氨基酸的洗脱顺序并说明原因,Leu、Asp、Ser,Lys。
内容
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以正丁醇:乙酸:水体系为溶剂(pH4.5),对下列氨基酸进行纸层析分离,指出下列各组中氨基酸的相对移动速度。(1)Ile、Lys(2)Phe、Ser(3)Ala、Val、Leu(4)Pro、Va1(5)G1u、Asp(6)Tyr、A1a、Ser、His
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(1)当Ala、Ser、Phe、Leu、Arg、Asp和His的混合物在pH3.9进行电泳时,哪些氨基酸移向正极(+)?哪些氨基酸移向负极(-)?(2)设Ala、Val、Glu、Lys和Thr的混合物pH位6.0,试指出纸电泳后氨基酸的分离情况。(3)纸电泳时,带有相同电荷的氨基酸常有少许分开,例如Gly与Leu分开。说明为什么?(Asp pI=2.98,Gly pI=5.97,.Thr pI=6.53,Leu pI=5.98, Lys pI=9.74,Ala pI=6.02, Ser pI=5.68, Phe pI=5.48, Arg pI=10.76,His pI=7.59, Val pI=5.97, Glu pI=3.22)
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如用阳离子交换树脂分离()D()、()K()和()M()三种氨基酸,用()pH7.0()的缓冲溶液洗脱时,先下来的氨基酸为()D()
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离子交换色谱分离氨基酸时,()先被洗脱下来。
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离子交换色谱分离氨基酸时,( )先被洗脱下来。