以膀胱癌为例,简述从肿瘤组织中克隆致癌基因的过程
膀胱中的一个基因ras发生突变为rasD,易产生膀胱癌,从其中克隆癌基因的过程如下:1)裂解膀胱癌组织细胞,提取DNA,并利用水解酶切割成约30~50bp的DNA片段;2)转染小鼠的3T3细胞系,进行培养;3)被转化的细胞在培养后则会与未被转化的细胞共同生长,因之增生较快,则会形成与正常细胞形态不同的“聚焦点”;4)把被转化的小鼠3T3细胞分离出来,抽提DNA,并切割成约30~50bp的DNA片段,实现第二次的DNA转染3T3细胞,这样即可以将人的非癌基因基本排除;5)抽提FocusDNA,并将之切割成一定大小的DNA片段,利用噬菌体作为载体,将其导入大肠杆菌,并涂板,实现亚克隆(subclone);
举一反三
内容
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当肿瘤抑制基因受到物理、化学或生物等致癌因素作用而激活变为活化的癌基因后才显示其致癌活性。
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原癌基因活化是 A: 属于功能失活突变 B: 病毒基因组中正常的癌基因转变为具有致癌能力的癌基因的过程 C: 病毒基因组中正常的原癌基因转变为具有致癌能力的癌基因的过程 D: 人体细胞内正常的癌基因转变为具有致癌能力的癌基因的过程 E: 人体细胞内正常的原癌基因转变为具有致癌能力的癌基因的过程
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原癌基因活化是 A: 属于功能失活突变 B: 病毒基因组中正常的癌基因转变为具有致癌能力的癌基因的过程 C: 病毒基因组中正常的原癌基因转变为具有致癌能力的癌基因的过程 D: 人体细胞内正常的癌基因转变为具有致癌能力的癌基因的过程 E: 人体细胞内正常的原癌基因转变为具有致癌能力的癌基因的过程
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关于膀胱肿瘤的分类正确的是()。 A: A分为上皮性或非上皮性肿瘤 B: B上皮性肿瘤约占膀胱肿瘤的95%,其中多数为膀胱癌 C: C非上皮性肿瘤有平滑肌瘤、嗜铬细胞瘤、淋巴瘤等 D: D膀胱癌多为移行细胞癌,少数为鳞癌和腺癌 E: E非上皮性肿瘤多见
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关于膀胱肿瘤的分类正确的是()。 A: 分为上皮性或非上皮性肿瘤\n B: 上皮性肿瘤约占膀胱肿瘤的95%,其中多数为膀胱癌\n C: 非上皮性肿瘤有平滑肌瘤、嗜铬细胞瘤、淋巴瘤等\n D: 膀胱癌多为移行细胞癌,少数为鳞癌和腺癌\n E: 非上皮性肿瘤多见